设备名称: 激光扫描共聚焦显微镜

型 号: TCS SP5II

产 地: 德国

生产厂家: 德国莱卡公司

购置时间: 2011年6月8日

价 格: 2068419元

存放地点： 科技楼408

仪器负责人: 赵颂 联系电话: 0416-4673775

主要配置:

1研究级显微镜；2振镜扫描头；3工作站；4显微镜控制单元；5激光电源和电源；6控制面板；7电脑桌；8防震表；9监视器；10电源控制；11智能移动控制；12 EL6000荧光照明；13键盘；14电脑鼠标

主要技术指标:

. 激光器：

红光HeNe激光器 谱线633nm 10mW；

绿光HeNe激光器 谱线543nm 1.2mW；

蓝光Ar激光器 谱线458nm, 476nm, 488nm, 514nm 50mW；

近紫外脉冲激光器 谱线405nm 3mW。

2. 检测通道：3个光谱型检测通道，检测波长范围400-800nm。

3. 扫描系统：

最大线扫描频率：2800赫兹(双向)，连续可调；

最大扫描分辨率：8192×8192像素；

最大帧频：5赫兹(512×512)；

扫描放大：1.0 – 64 ×；

视野旋转：200°；

扫描视场对角线：21.2 mm。

主要用途(或应用领域):

1. 荧光定位、定量测量。

2. 荧光断层扫描、重叠及三维重建。

3. 荧光光漂白恢复（FRAP）和荧光能量共振转移（FRET）分析。

4. 荧光相关光谱（FCS）及荧光寿命成像（FLIM）测量分析。

5. 其它应用。

仪器操作流程(使用步骤):

一、 启动系统：

1、 打开共聚焦系统的开关将 REMOTE CONTROL 上的System/PC Components开关置于ON的位置。

2、 打开汞灯电源开关。

3、 启动共聚焦软件，双击计算机桌面上的 LSM 510 图标启动共聚焦软件。

4、 出现窗口后，点击 Scan New Images 按钮；点击 Start Expert Mode 按钮；点击主菜单工具栏上的

File 按钮；点击 New 按钮。出现 Create New Database 窗口，选择文件夹，输入数据库名，并点击 Creat 按钮。如果需要，建立新文件夹。

5、启动激光，点击主菜单工具栏上的 Acquire 按钮打开 Acquire 下的二级工具栏。点击 Laser 按钮打开 Laser Control 窗口，过点击激光单元的名字选择需要的激光。点击 Standby 按钮；当状态显示为 Ready，点击 On 按

钮。如果没有Standby 按钮，则直接点击On 按钮。

二、设置显微镜：

1、在直接观察和激光扫描之间切换：通过 VIS，TV 和 LSM 按钮在直接观察和激光扫描之间切换光路设置；点击 VIS 按钮将光路设置为通过目镜直接观察，此时激光切断；点击 LSM 按钮将光路设置为激光扫描，在显示器屏幕显示图像。

2、设置显微镜：点击 VIS 按钮切换到直接观察。点击 Micro 按钮打开 Microscope Control 窗口，选择物镜点击 Objective 按钮；点击需要使用的物镜，所选择的物镜会自动转入光路。

3、选择物镜：点击 Objective 按钮 ；点击需要使用的物镜，所选择的物镜会自动转入光路。

以荧光观察方式聚焦样品：把样品放置在载物台上，盖波片要朝向物镜。点击 Reflected Light 按钮，打开汞灯光闸。点击 Reflector按钮，根据样品所标记的荧光染料选择滤光片。对样品聚焦。选择需要观察的视野。

4、配置光路和激光：点击 LSM 按钮切换到激光扫描；点击 Config 按钮打开 Configuration Control 窗口。

三、 扫描图像：

1、点击 Scan 按钮，打开 Scan Control 窗口。

2、设置初始扫描参数并扫描：点击 Mode 按钮；点击 Frame 按钮设置图像类型；点击 512 按钮设置扫描分辨率；点击 Reset 按钮重置变倍和视野中心；点击 Max 按钮设置扫描速度；点击 12 Bit 按钮及 按钮；选择 Number 为 1；点击 Channels 按钮；点击 1 按钮；点击 Find 按钮。

3、优化扫描：点击图像右侧的 Palette 按钮，选择 Range Indicator；点击 Cont 按钮进行连续扫描；调节 Detector Gain，使图像中仅留少量红色像素；调节 Amplifier Offset，使图像背景为蓝色；点击 Stop 按钮停止扫描。点击图像右侧的 Palette 按钮，选择 No Palette。

4、点击 Mode 按钮：点击 1024 或 2048 按钮设置较高的扫描分辨率；选择 Number 为 2 或 4；点击 Single 按钮，完成较高质量的图像扫描。

四、保存图像

1、点击图像窗口右侧的 Save 或 Save As 按钮，打开 Save Image and Parameter As 窗口；

输入文件名；点击 OK 按钮。

五、关闭系统

点击 Laser 按钮，选择所使用的激光，点击 Off 按钮；点击 File 按钮，再点击 Exit 按钮；关闭计算机；等候5分钟左右，至Ar离子激光器的风扇停止运转。将 REMOT CONTROL 上的 Components 开关和 System/PC 开关置于 OFF 。关闭汞灯电源